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  • [分享]HPLC六通阀进样器的使用及保养

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  • lilyshine
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  • 发表于:2009-04-20 17:13:10

六通阀进样器是高效液相色谱系统中最理想的进样器,它是由圆形密封垫(转子)和固定底座(定子)组成。美国Rheodyne公司的六通阀进样器最为通用,各大HPLC仪器制造商均以此产品作为仪器的进样器。

工作原理:

1、手柄位进样(Load)位置时,样品经微量进样针从进样孔注射进定量环,定量环充满后,多余样品从放空孔排出;

2、将手柄转动至进样(Inject)位置时,阀与液相流路接通,由泵输送的流动相冲洗定量环,推动样品进入液相分析柱进行分析。

虽然六通阀进样器具有结构简单、使用方便、寿命长、日常无需维修等特点,但正确的使用和维护将能增加使用寿命,保护周边设备,同时增加分析准确度。如使用得当的话,六通阀进样器一般可连续进样3万次而无需维修。

以下浅谈有关六通阀进样器的使用及保养事宜(仅供参考):

1、手柄处于Load和Inject之间时,由于暂时堵住了流路,流路中压力骤增,再转到进样位,过高的压力在柱头上引起损坏,所以应尽快转动阀,不能停留在中途。在HPLC系统中使用的注射器针头有别于气相色谱,是平头注射器。一方面,针头外侧紧贴进样器密封管内侧,密封性能好,不漏液,不引入空气;另一方面,也防止了针头刺坏密封组件及定子。

2、六通阀进样器的进样方式有部分装液法和完全装液法两种。使用部分装液法进样时,进样量最多为定量环体积的75%,如20gL的定量环最多进样15p,L的样品,并且要求每次进样体积准确、相同;使用完全装液法进样时,进样量最少为定量环体积的3至5倍,即20gL的定量环最少进样60至1001aL的样品,这样才能完全置换样品定量环内残留的溶液,达到所要求的精密度及重现性。推荐采用100ul的平头进样针配合20ul满环进样。VBm21世纪图书馆

3、可根据进样体积的需要自已制作定量环,一般不要求精确计算定量环的体积,譬如,一根名义上10gL的定量环,实际是9gL还是1lgL并不重要,因为被测样品和校正样品的进样体积保持一致,在计算结果时误差都被抵消了。

4、进样样品要求无微粒和能阻死针头及进样阀的物质,样品溶液均要用0.45~tm的滤膜过滤。防止微粒阻塞进样阀和减少对进样阀的磨损。为防止缓冲盐和其它残留物质留在进样系统中,每次结束后应冲洗进样器,通常用不含盐的稀释剂、水或不含盐的流动相冲洗,在进样阀的Load和Inject位置反复冲洗,再用无纤维纸擦净注射器针头的外侧。

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  • xiaoli1980
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  • 发表于:2009-04-27 14:03:26
六通阀进样器的进样方式有部分装液法和完全装液法两种。使用部分装液法进样时,进样量最多为定量环体积的75%,如20gL的定量环最多进样15p,L的样品,并且要求每次进样体积准确、相同;使用完全装液法进样时,进样量最少为定量环体积的3至5倍,即20gL的定量环最少进样60至1001aL的样品,这样才能完全置换样品定量环内残留的溶液,达到所要求的精密度及重现性。推荐采用100ul的平头进样针配合20ul满环进样。VBm21世纪图书馆

3、可根据进样体积的需要自已制作定量环,一般不要求精确计算定量环的体积,譬如,一根名义上10gL的定量环,实际是9gL还是1lgL并不重要,因为被测样品和校正样品的进样体积保持一致,在计算结果时误差都被抵消了。

这些知识还是第一次听说,谢谢楼主!

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  • guigui
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  • 发表于:2009-04-28 15:11:32
看看不锈钢定量环是什么样的吧

不锈钢定量环.jpg

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  • guigui
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  • 发表于:2009-04-28 15:19:03
想详细了解的话,看看 上海舜宇恒平科学仪器有限公司提供的不锈钢定量环的资料.英文的

Rheodyne® Rotor Seals and Stators.pdf

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  • guigui
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  • 发表于:2009-04-28 15:20:51
本楼已被删除!
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  • xiaoli
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  • 发表于:2009-05-04 15:40:39
定量环顾名思义就是在此管路中的液体的体积是一个固定量,根据需要通常分为5μl、10μl、20μl等。由于手动进样受视线、注射器精度等的影响,一般不太准确,所以在进样器的内部接一根容量限定的环路(即定量环)以确保进样的准确性和一致性。一般进样需进数倍于定量环体积的样品量。
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  • heiya
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  • 发表于:2009-05-05 18:05:09
学习一下!
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  • huaxianzi
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  • 发表于:2009-05-11 15:51:34
定量环原理很简单,依靠六通阀的切换,流动相将定量环里面一定量的样品带进柱子。

如果不需要准确定量,可以以小于定量环体积的量来进样;

如果要准确定量,且需要重现性好的话,一定要以数倍与定量环的体积进样。

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  • redleaf
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  • 发表于:2009-05-13 16:37:47
使用定量环,加样量一定要是定量环的2到3倍吗?感觉没必要吧
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  • redleaf
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  • 发表于:2009-05-13 16:40:30
低于定量环容量的进样好像也有呢
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  • linghu
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  • 发表于:2009-05-14 16:43:09
色谱柱的维护 

1.使用预柱保护分析柱(硅胶在极性流动相/离子性流动相中有一定的溶解度)

2.大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2-7.5,尽量不超过该色谱柱的pH范围

3.避免流动相组成及极性的剧烈变化

4.流动相使用前必须经脱气和过滤处理

5.如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相,应在实验完毕柱子冲洗干净,并保存在乙腈中 

6.压力升高是需要更换预柱的信号